第391章 五毫克(1/2)
小周在中试车间守了三天没回宿舍,张浩给他弄了一张行军床塞在控制台后面。甲醇进料速度从最初的3mL/min手动提到了4.5mL/min——DO一度掉到15%以下,搅拌转速从200拉到280才拉回来,小周差点以为菌要死了。
幸好没死。
第四天早上,何建邦亲自到车间放罐。
两百升黄浊的发酵液通过连续流离心机分离,湿菌体收了一点七公斤。
小陈接手,高压匀浆破壁,硫酸铵分级沉淀粗提。
SDS-PAGE胶上目标条带比小试浓了至少五倍,看得何建邦喉结动了一下。
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下午,镍柱亲和层析纯化。
因为用的是全合成培养基没加血清,杂蛋白比预期少,一次过柱纯度就到了85%以上。
何建邦不敢省第二步,又跑了一遍离子交换,纯度升至97%。
Bradford法测蛋白浓度,最终收获的纯化目标蛋白:二十三点四毫克。
这个数字比预估的上限还多了三毫克。
「转化率?」何建邦在电话里问小周。
小周敲了一阵计算器。「HPLC测底物消耗后推算,这批的转化率是4.2%,比小试的3.7%高了半个百分点。张浩的罐子控温太好了,酶活这块直接受益。」
4.2%。
不算高,但对于一个未经任何密码子优化和启动子工程的野生型CYP450来说,已经是拿得出手的数据了。
何建邦把二十三毫克纯品分成三份。
八毫克送核磁——比最低要求多了三毫克,保险。
五毫克留给小陈做细胞毒性试验。
剩下的十毫克冻存在-80度冰箱。
核磁排在周四,还有两天。
罗明宇收到进展后没回消息——他正在急诊手术室里。
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一个二十八岁的外卖小哥骑电瓶车在红桥路口被右转的混凝土搅拌车剐了后轮,人从车上飞出去滑行了四五米。
左小腿胫骨开放性骨折,骨茬穿出皮肤两厘米,伤口边缘夹着沥青渣和碎塑料壳。
右手手掌被地面磨掉一块皮,面积约4×5厘米,真皮层暴露。
张波已经开始清创了。
左小腿的伤口冲了两遍碘伏两遍盐水,异物挑了十几颗,骨折端用生理盐水持续冲洗。
问题在于骨折端污染比较重——搅拌车轮子碾过路面带起的混凝土粉末和泥沙嵌入了骨断面的髓腔口。
「髓腔冲不乾净。」张波抬头。
罗明宇换上手套看了看创口。
内固定是不可能的——污染这么重一期内固定等于埋感染炸弹。
常规操作是外固定架固定丶开放换药,等伤口乾净了二期再做钢板。
但外固定架红桥只有一套国产的,还是上个月碧水湾社区转来一个转子间骨折时拆下来消毒备用的。
孙立当时花了不到两千块从一家倒闭骨科诊所淘来的,品牌是没听说过的小厂,螺纹精度孙立亲自用游标卡尺量过,误差在合格范围内——0.08毫米。
「上外固定。」罗明宇做了决定。「张波你打钉,我协助复位。髓腔用脉冲冲洗器再灌一遍,灌完塞一条碘仿纱条进去引流三天,别封口。」
「师父,脉冲冲洗器我们没买过……」
「老钱用注射器和三通阀改了一个。护士站第三个抽屉里,白盒子,上面用记号笔写着'土炮洗腿'。」
张波去翻抽屉,果然找到了。
一个50毫升注射器连着三通阀,出水端接了一截细矽胶管,管头剪成斜口增加水流冲击力。
包装盒上老钱的字迹潦草——「土炮洗腿v2.0,严禁煮面」。
冲洗完毕,碘仿纱条塞入髓腔口松松引流。
罗明宇复位骨折端——手法正骨不需要C臂机,他凭触觉和那双做过上千台手术的手感受到骨断面咬合的震动反馈。
「好了。标准侧位和正位拍片确认。」
外固定架固定完,四根螺钉两近端两远端,张波拧紧连接杆的时候打滑了一下——国产架子的棘轮扳手手感确实不怎么样。
「拧到位没有?」
「到了。力矩够。」张波把扳手放下,看了看整体构型,「师父,你觉得这个架子能撑到二期吗?」
「能。螺钉界面稳定性取决于骨质条件,不是品牌。这小伙子二十八岁,骨质好,撑三个月没问题。」
右手手掌的磨洗伤比较棘手。
面积不大但深度达到真皮层,关键位置——手掌鱼际区域。
如果愈合不好留瘢痕挛缩,捏手机和握车把都会受影响,而这两样东西是外卖骑手的命。
「红桥二号。」罗明宇朝门口喊了一声。
护士小王跑过来递了一管生物敷料膏剂。
罗明宇薄薄涂了一层在创面上,外面覆盖凡士林油纱。
「术后抗生素用什么?」张波问。
「头孢呋辛加甲硝唑。开放骨折常规联合,覆盖厌氧菌。」罗明宇洗手的时候停了一下,「头孢呋辛库存还有多少?」
张波查了药房系统。「二十六支。」
「省着用。」
康达断供之后,头孢类抗生素的进货渠道一直没完全打通。
鑫昌医疗虽然补了大部分品种,但头孢呋辛这种用量大的基础药,鑫昌的产能跟不上。
孙立前天在催他们加单,对方说最快也要下周五到货。
红桥的储药柜从来没宽裕过。
外卖小哥从手术室推出来时已经醒了,头上缠着纱布——额头蹭掉了一小块皮,张波顺手清创贴了创可贴。
「哥,我的电瓶车呢?」这是他醒来说的第一句话。
「车让交警拖走了。你先别想车。」护士小王推着他往留观室走。
「不是——哥你不懂,我那车后座箱里还有两单没送完,超时要扣钱的。」
罗明宇走过来看了他一眼。
二十八岁,脸上还有路面磨蹭留下的血痂,左腿裹着纱布支在支架上,右手整个包成棒子,嘴里念叨的是两单外卖扣不扣钱。
「你叫什么?」
「王鹏程。」
「王鹏程,你的腿三个月不能负重,手掌两周不能握东西。这段时间外卖送不了。」
王鹏程脸上的表情经历了从痛到急到垮的变化。「那我房租怎么办……」
「工伤。搅拌车有全责,保险公司赔。你先治伤,钱的事让家里人来找孙立——门口穿花衬衫那个——他会帮你走流程。」
「我没家里人在长湘。」
「朋友?同事?」
「跑外卖的谁有空陪你看病……」
罗明宇在心里骂了一句-->>
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